Барномаи "Барномаи ташхис ва табобати нави вируси коронарии пневмония (Нашри нӯҳуми озмоиш)" арзиши муайянкунии кислотаи нуклеини Ct-ро ≥35 ҳамчун яке аз асосҳои муҳим барои озод кардани идоракунии изолятсия ё разряд истифода мебарад.Пас, арзиши Ct маҷмӯаи муайянкунии кислотаи нуклеинӣ чиро ифода мекунад?Оё арзишҳои Ct-и маҷмӯаҳои гуногун муқоисашавандаанд?Оё арзиши Ct камтар бошад, кори маҷмӯа ҳамон қадар беҳтар аст?
Қимати Ct (Threshold Cycle, Ct) шумораи давраҳои PCR аст, вақте ки шиддатнокии сигнали флуорессенси миқдорӣ дар вақти воқеӣ аз ҳадди муқарраршуда зиёд мешавад.Маҷмӯаҳои муайянкунандаи кислотаи нуклеинӣ тоҷи навро мисол мегиранд.Барои як реаксияи як маҷмӯа барои ошкор кардани ду намунаи дорои вируси А ва В, андозаи арзиши Ct, то андозае, шумораи нусхаҳои гени вирусӣ, яъне сарбории вирусиро ифода мекунад.Чӣ қадаре ки Ct намунаи В паст бошад, ҳамон қадар сарбории вирусӣ зиёд мешавад.Қимати Ct ба сарбории вирусӣ ва сироятнокии он мутаносиб аст.Тарафҳои мусбат ва манфии маҷмӯаҳои миқдории флуорессенсияи гуногуни вақти воқеӣ наметавонанд танҳо аз рӯи андозаи арзиши Ct доварӣ карда шаванд, зеро арзишҳои Ct-и маҷмӯаҳои гуногун муқоисашаванда нестанд.Арзёбии кори маҷмӯа бояд аз ҷанбаҳои ҳассосият (ҳадди ақали ошкор), мушаххасият, дақиқӣ, устуворӣ ва татбиқи ташхис чен карда шавад.Ҳар як истеҳсолкунандаи реактив ҳаждаҳ намуди санъати ҳарбии худро дорад ва онҳо дар татбиқ қудрати ҷодугарии худро доранд, бинобар ин ман дар ин ҷо ба тафсилот намеравам.
Барои асбобҳо/системаҳои таҳлили муқаррарии PCR (QPCR) дар вақти воқеӣ ба даст овардани арзишҳои Ct ва истифодаи васеъи онҳо дар барномаҳои муайянкунии патоген ба ҳама шинос аст.Бо рушди саноат ва пешрафти технология, таҷҳизоти QPCR ва реагентҳо ба имкониятҳо ва мушкилот дучор шуданд.Yiou Think Tank (Ҳисоботи тадқиқоти 2021 оид ба саноати санҷиши генетикии Чин: Технология) таҳлил кардааст, ки аксари ширкатҳо дар саноати QPCR дар кишвари ман бо мушкилоти умумӣ дар асоси технология дучор меоянд.Дар посух ба ин мушкилот, роҳҳои ҳалли онҳо асосан ба ду намуд тақсим мешаванд: суръат бахшидан ба такмили технология ва ҷорӣ намудани технологияҳои нав.
POCT барои ташхиси молекулавии QPCR яке аз самтҳои рушди соҳа мебошад ва беҳбуди кор омили муҳими суръат бахшидан ба татбиқи технология мебошад.Барои таҷҳизоти POCT бо интиқоли як намунаи QPCR, чӣ гуна арзиши Ct-и параметри асосии реаксияи ягона дар R&D оптимизатсия карда шавад?Ҳамон таҷҳизот, ҳамон системаи реаксия ва ҳамон консентратсияи шаблон, аз ҷиҳати назариявӣ, ҳар қадар ки арзиши Ct як реаксия калонтар бошад, самаранокии фермент дар реаксия ҳамон қадар паст мешавад.
Дар раванди баланд бардоштани самаранокии реаксияи ферментҳо ва оптимизатсияи арзиши Ct, аввал хати каҷи амплификацияи миқдории флуорессенси 40-и ПТР-ро метавон таҳлил кард.Каҷи пурқувват дар расми зер ба марҳилаи заминаи флуоресцентӣ, марҳилаи амплификацияи экспоненсиалӣ, марҳилаи хатӣ ва марҳилаи плато тақсим карда мешавад.Барои ноил шудан ба заминаи флуорессенси камтар, то ҳадди имкон фарқ кардани он аз арзиши флуорессенси амплификатсияи барвақти экспоненсиалӣ, санҷиш аз интиқолдиҳандаи реаксия, скрининги тарҳи зондҳои ибтидоӣ ва системаи буферии реаксия зарур аст.Давраи пурқувваткунии экспоненсиалӣ реаксияи бевоситаи фаъолияти ферментҳо мебошад ва он инчунин далели ҳамоҳангии комили таҷҳизоти POCT, интиқолдиҳандаҳои реаксия ва реагентҳо мебошад.Дар айни замон, назорати ҳарорати таҷҳизот, ба даст овардан ва таҳлили сигнали оптикӣ, мутобиқати биологии интиқолдиҳанда ва кори системаи реагентҳо бояд дар ҳама ҷанбаҳо танзим ва санҷида шаванд.Ниҳоят, тамоми пурқувваткунӣ анҷом дода мешавад ва натиҷаҳо бояд бо алгоритми дақиқи додаҳо пешниҳод карда шаванд, то арзиши оқилонаи Ct ба даст оранд.
Қадами хурд дар оптимизатсияи арзиши Ct ин қадамҳои бешумори кормандони R&D мебошад.Дар ташвишу изтироби шабу руз хар бор «куху руд дар кучо нест, бед тира гулу гулзору як дехаи дигар аст», ки ба мо часорату шавку хаваси пеш рафтан мебахшад. боз.
Вақти фиристодан: сентябр-29-2022